당신이 원하는 미생물 지식
미생물은 자연계에 널리 존재하는 작은 유기체의 집단으로 육안으로는 보이지 않으며 광학 현미경이나 전자 현미경의 도움을 받아 수백, 수천, 심지어는 수만 배 확대해야 합니다. 작은 크기, 단순한 구조, 빠른 번식, 쉬운 변형, 환경 적응력 등의 장점이 있습니다.
미생물 분류:
적어도 100000 종류 이상의 많은 종류의 미생물이 있습니다. 그 구조에 따라 화학 성분과 생활 습관 및 기타 차이점은 세 가지 범주로 나눌 수 있습니다.
진핵 미생물 세포 핵은 핵막, 핵소체 및 염색체를 포함하여 더 높은 분화도를 가지고 있습니다. 세포질에는 완전한 소기관(예: 소포체, 리보솜 및 미토콘드리아 등)이 있습니다. 곰팡이는 이러한 유형의 미생물에 속합니다.
원핵 미생물 세포는 핵 분화도가 낮고 원시 핵질만 있으며 핵막과 핵소체는 없습니다. 소기관은 완전하지 않습니다. 박테리아, 스피로헤타, 마이코플라스마, 리케차, 클라미디아 및 방선균을 포함하여 그러한 미생물의 많은 종이 있습니다.
무세포 미생물은 전형적인 세포 구조가 없고 에너지를 생성하는 효소 시스템이 없으며 살아 있는 세포에서만 성장하고 번식할 수 있습니다. 바이러스는 이러한 유형의 미생물에 속합니다.
미생물의 분리 및 정제
하나 이상의 종을 포함하는 미생물 배양을 혼합 배양이라고 합니다. 콜로니의 모든 세포가 하나의 부모 세포에서 파생된 경우 콜로니를 순수 배양이라고 합니다. 박테리아 종의 동정에서 사용되는 미생물은 일반적으로 순수 배양물이어야 합니다. 순수배양물을 얻는 과정을 분리정제라고 하며 그 방법에는 여러 가지가 있다.
1. 푸어 플레이트 방식
먼저 미생물 현탁액을 순차적으로 희석하고 일정량의 희석액을 약 40-50도를 유지하는 용해된 영양 한천배지에 충분히 혼합한 다음 혼합물을 멸균 페트리 접시에 붓는다. 응고 후, 플레이트를 일정한 챔버에서 거꾸로 인큐베이션하였다. 단일 세포를 증식시켜 콜로니를 형성하고, 단일 콜로니를 취하여 현탁액을 만들고, 상기 단계를 여러 번 반복하여 순수한 배양액을 얻는다.
2. 코팅 평판 방식
먼저 미생물 현탁액을 적절히 희석하고, 희석액 일정량을 응고된 멸균 영양 한천 플레이트에 놓은 다음 멸균 유리 주걱으로 배지 표면에 희석액을 고르게 펴 바릅니다. 일정한 온도에서 배양하여 단일 콜로니를 얻을 수 있습니다.
3. 플레이트 스크라이브 방법
미생물을 분리하는 가장 쉬운 방법은 줄무늬입니다. 멸균 루프를 사용하여 플레이트에 소량의 배양액을 줄무늬로 만듭니다. 필기 방법에는 여러 가지가 있습니다. 단일 콜로니로 나타날 가능성이 더 높은 일반적인 스크라이빙 방법은 슬래시 방법, 곡선 방법, 사각형 방법, 방사 방법 및 4격자 방법입니다. 접종 루프가 배지 표면에서 뒤로 이동하면 접종 루프의 박테리아 액체가 점차 희석되고 최종적으로 하나의 세포가 그려진 선에 흩어집니다. 배양 후 각 세포는 콜로니로 자랍니다.
4. 증균배양법
농축배양법의 방법과 원리는 매우 간단하다. 우리는 원하는 미생물만 자랄 수 있는 조건을 만들 수 있으며 이러한 조건에서 원하는 미생물은 다른 미생물과 효과적으로 경쟁할 수 있으며 성장 능력 면에서 다른 미생물을 훨씬 능가할 수 있습니다. 일부 절대 기생충을 분리해야 하는 경우 샘플을 해당 감수성이 있는 숙주 세포 집단에 접종하여 대량으로 성장시켜야 합니다. 파종을 반복하면 순수한 기생균을 얻을 수 있습니다.
5. 혐기성법
실험실에서는 일부 혐기성세균을 분리하기 위하여 원래의 배지가 들어있는 시험관을 배양용기로 사용할 수 있으며 시험관을 끓는 수욕조에서 수분간 가열하여 배지의 용존산소를 배출시킬 수 있다. . 그런 다음 빠르게 식히고 접종합니다. 접종 후 멸균 파라핀을 배지 표면에 첨가하여 배지를 공기로부터 격리시켰다. 또 다른 방법은 접종 후 배지의 가스를 N2 또는 CO2로 교체한 다음 시험관 입구를 화염으로 밀봉하는 것입니다. 때로는 일부 혐기성 박테리아를 보다 효율적으로 분리하기 위해 분리된 샘플을 배지에 접종한 다음 페트리 접시를 완전히 밀봉된 혐기성 배양 장치에 넣을 수 있습니다.
6. 단세포(또는 단포자) 분리법
순수한 배양물을 얻기 위해 배양을 위해 혼합된 집단에서 단일 세포 또는 단일 개체를 직접 분리하는 미세분리 방법을 취하는 것입니다. 더 큰 미생물의 경우 모세관을 사용하여 단일 개체를 추출할 수 있습니다. 개체 수가 비교적 작은 미생물의 경우, 현미경 하에서 모세관 또는 미세바늘, 후크, 루프 등으로 단일 미생물 세포 또는 포자를 채취하여 순수 배양물을 얻기 위한 미세조작기가 필요하다. 단일 세포 분리 방법은 작동 기술에 대한 요구 사항이 상대적으로 높습니다.
미생물 배양
1. 배양시 산소의 필요 여부에 따라 호기배양과 혐기배양으로 구분할 수 있다.
호기성 배양: "호기성 배양"이라고도 합니다. 즉, 이 미생물을 배양할 때 산소를 공급해주지 않으면 잘 자라지 않습니다. 실험실에서는 솜마개를 통해 외부로부터 멸균공기를 얻어 사면배양을 한다. 삼각 플라스크의 액체 배양액은 대부분 쉐이커로 흔들기 때문에 외부 공기가 지속적으로 병에 들어갈 수 있습니다.
혐기성 배양: "혐기성 배양"이라고도 합니다. 이러한 미생물은 배양에 참여하기 위해 산소가 필요하지 않습니다. 혐기성 미생물의 배양과정에서 가장 중요한 점은 배지 속의 산소를 제거하는 것이다.
2. 배지의 물리적 상태에 따라 고체 배양과 액체 배양의 두 가지 범주로 나눌 수 있습니다.
고체배양 : 균주를 느슨하고 영양이 풍부한 고체배지에 접종하여 적당한 조건에서 미생물을 배양하는 방법이다.
액체 배양: 실험에서 액체 배양은 미생물을 빠르게 증식시키고 많은 수의 배양물을 얻을 수 있습니다. 특정 조건에서 미생물이 박테리아를 선택하고 풍부하게 하는 효과적인 방법이기도 합니다.
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마이클 펭
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