세포 관련 실험을 하는 친구들은 세포 동결 방법을 자주 사용해야 합니다. 요컨대, 세포 동결 저장은 장기 보존의 목적을 달성하기 위해 저온 환경에서 세포를 저장하는 것입니다. 세포는 전송 과정에서 어느 정도의 돌연변이를 갖게 됩니다. 세포 오염 및 돌연변이의 경우에도 세포를 계속 사용할 수 있도록 하기 위해 일부 세포는 일반적으로 동결에 사용됩니다.
셀 동결의 원리
세포 동결 및 회복 과정의 한 가지 원칙은 세포의 생명력을 최대한 살리기 위한 "완속 동결 융합"입니다. 간단히 말해, 냉동 및 냉각 시에는 천천히, 저온에서 회수 시에는 급속히 가열해야 합니다. 느린 동결을 하는 이유는 세포를 액체 질소와 같은 초저온 환경에 직접 두면 세포가 큰 얼음 결정을 형성하여 세포를 손상시키기 때문입니다.
천천히 얼리면 세포가 천천히 탈수되어 세포를 보호하는 목적을 달성할 수 있습니다. 또한 회복시 작은 얼음 결정이 큰 얼음 결정, 즉 얼음 결정의 무거운 결정을 형성하는 것을 방지하기 위함이기도 합니다. 따라서 누구나 평소에 세포 동결을 하게 되면 항상 세포 손실이 발생하게 되어 동결 단계에 영향을 미칠 가능성이 높습니다.
여러 가지 세포 동결 방법
수동 방법: 세포 동결은 일반적으로 액체 질소에 보관됩니다. 수동 조작 방법은 냉장고에서 그라데이션을 식히는 것입니다. 냉동 보관관에 세포를 보관하고, 4℃, -20℃, -80℃ 순서대로 냉장 환경에 보관합니다. 액체 질소로 옮기기 전에 -80도 C에서 24시간 동안 냉동했습니다. 수동 냉각에는 다른 소모품의 추가 보충이 필요하지 않습니다. 수동으로 조작할 수 있습니다. 가장 간단하지만 간단하지 않습니다. 실제 작업은 번거 롭습니다. 그리고 그 효과는 그리 좋지 않습니다. 왜냐하면 이 냉각 방법은 여전히 균일하지 않고 더 깨지기 쉬운 세포에 반드시 적용할 수 있는 것은 아니기 때문입니다.
구배 냉각 상자 : 시중에서 판매되는 구배 냉각 상자는 냉동 공정의 균일한 냉각에 특별히 사용됩니다. 냉각 속도는 일반적으로 -1도/분입니다. 동결된 저장관을 구배 냉각 상자에 넣고, 구배 냉각 상자를 직접 -80℃의 냉장고 환경에 두어 수동 구배 작동 없이 하룻밤을 보냅니다. 그런 다음 보관 튜브를 낮추고 액체 질소에 넣습니다. 시중의 상업용 냉각 상자는 대략 균일한 냉각 속도를 보장할 수 있기 때문에 구배 냉각 상자를 사용하는 것이 더 좋습니다.
시장에는 두 가지 일반적인 그라데이션 냉각 상자가 있습니다. 일반적으로 PC 상자 본체인 이소프로필을 추가해야 합니다. 사용 시 상자 안의 눈금선에 isopenol을 추가하여 사용하십시오. 이소프로판올은 열 저장 및 분배를 위한 운반체로 사용됩니다.
또 다른 종류는 이소 프로필, 발포제를 추가할 필요가 없으며 사용 중에 냉동고를 직접 둘 수 있어 작동이 더 편리합니다.
이소프로판올의 냉각통은 여러 번 사용한 후 액을 교체하는 것이 좋지만 이소프로판올은 실험과 환경에 해를 끼치는 유해한 액체이기 때문에 보통 여러 번 사용할 수 있습니다. 그러나 액체가 일정량인지 확인해야 합니다.
프로그램되지 않은 냉동 보관: 시중에서 구입할 수 있는 프로그램되지 않은 냉동 액체를 사용하십시오. 전통적인 냉동 액체와 비교하여 내부 구성 요소는 얼음 결정 세포의 손상을 줄일 수 있으므로 냉각을 위해 기울기를 사용할 필요가 없으며 기울기 냉각 상자가 필요하지 않습니다. 냉동 보관은 -80℃의 냉장고 환경에 직접 놓을 수 있습니다.
많은 세포 샘플은 매우 소중합니다. 우리 외에도 실험을 할 때 꼭 사용해야 합니다. 또한 관련 상품 선택에서 최대한 좋은 상품을 선택하셔야 합니다. 품질이 검증된 냉동 저장 튜브를 선택하고, 동결을 위해 구배 냉각 도구를 사용하고, 미미한 손실로 인한 작은 손실을 피하기 위해 세포에 대한 낮은 손상 보장을 최대화하십시오.